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帶您了解微生物實(shí)驗室功能分區
來(lái)源: 點(diǎn)擊數:4574次 更新時(shí)間:2020/5/9 16:25:17

    食品微生物實(shí)驗室主要負責各類(lèi)微生物項目的檢測,主要檢測項目有菌落總數、大腸菌群、霉菌、酵母、乳酸菌、雙歧桿菌、罐頭商業(yè)無(wú)菌、致病菌(如沙門(mén)氏菌、志賀氏菌、溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌等)。

    微生物實(shí)驗室由準備室、洗滌室、滅菌室、無(wú)菌室、恒溫培養室和普通實(shí)驗室六部分組成。這些房間的共同特點(diǎn)是地板和墻壁的質(zhì)地光滑堅硬,儀器和設備的陳設簡(jiǎn)潔,便于打掃衛生。

    微實(shí)驗室選址

    三級生物安全防護實(shí)驗室可與其他用途房屋設在一棟建筑物中,但必須自成一區。該區通過(guò)隔離門(mén)與公共走廊或公共部位相隔。

    微生物實(shí)驗室功能分區

    平面布局

    三級生物安全防護實(shí)驗室的核心區包括實(shí)驗間及與之相連的緩沖間;緩沖間形成進(jìn)入實(shí)驗間的通道。必須設兩道連鎖門(mén),當其中一道門(mén)打開(kāi)時(shí),另一道門(mén)自動(dòng)處于關(guān)閉狀態(tài)。如使用電動(dòng)連鎖裝置,斷電時(shí)兩道門(mén)均必須處于可打開(kāi)狀態(tài)。在緩沖間可進(jìn)行二次更衣;當實(shí)驗室的通風(fēng)系統不設自動(dòng)控制裝置時(shí),緩沖間面積不宜過(guò)大,不宜超過(guò)實(shí)驗間面積的八分之一;Ⅱ級或Ⅲ級生物安全柜的安裝位置應遠離實(shí)驗間入口,避開(kāi)工作人員頻繁走動(dòng)的區域,且有利于形成氣流由“清潔”區域流向“污染”區域的氣流流型。

    準備室

    準備室用于配制培養基和樣品處理等。室內設有試劑柜、存放器具或材料的專(zhuān)柜、實(shí)驗臺、電爐、冰箱和上下水道、電源等。

    洗滌室

    洗滌室用于洗刷器皿等。由于使用過(guò)的器皿已被微生物污染,有時(shí)還會(huì )存在病原微生物。因此,在條件允許的情況下,最好設置洗滌室。室內應備有加熱器、蒸鍋,洗刷器皿用的盆、桶等,還應有各種瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等。

    滅菌室

    滅菌室主要用于培養基的滅菌和各種器具的滅菌,室內應備有高壓蒸汽滅菌器、烘箱等滅菌設備及設施。

    無(wú)菌室

    無(wú)菌室一般為4 - 5 平方米、高 2.5 米的獨立小房間(與外間隔離),專(zhuān)辟于微生物實(shí)驗室內。

    無(wú)菌室也稱(chēng)接種室,是系統接種、純化菌種等無(wú)菌操作的專(zhuān)用實(shí)驗室。在微生物工作中,菌種的接種移植是一項主要操作,這項操作的特點(diǎn)就是要保證菌種純種,防止雜菌的污染。在一般環(huán)境的空氣中,由于存在許多塵埃和雜菌,很易造成污染,對接種工作干擾很大。

    1.無(wú)菌室的設置

    無(wú)菌室應根據既經(jīng)濟又科學(xué)的原則來(lái)設置。其基本要求有以下幾點(diǎn):

    (1)無(wú)菌室應有內、外兩間,內間是無(wú)菌室,外間是緩沖室。房間容積不宜過(guò)大,以便于空氣滅菌。最小內間面積2×2.5=5m2,外間面積1×2=2m2,高以2.5m以下為宜,都應有天花板。

    (2)內間應當設拉門(mén),以減少空氣的波動(dòng),門(mén)應設在離工作臺最遠的位置上;外間的門(mén)最好也用拉門(mén),要設在距內間最遠的位置上。

    (3)在分隔內間與外間的墻壁或“隔扇”上,應開(kāi)一個(gè)小窗,作接種過(guò)程中必要的內外傳遞物品的通道,以減少人員進(jìn)出內間的次數,降低污染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm,內外都掛對拉的窗扇。

    (4)無(wú)菌室容積小而嚴密,使用一段時(shí)間后,室內溫度很高,故應設置通氣窗。通氣窗應設在內室進(jìn)門(mén)處的頂棚上(即離工作臺最遠的位置),最好為雙層結構,外層為百葉窗,內層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內室使用后、滅菌前開(kāi)啟,以流通空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機。

    2.無(wú)菌室內設備和用具

    (1)無(wú)菌室內的工作臺,不論是什么材質(zhì)、用途的,都要求表面光滑和臺面水平。

    (2)在內室和外室各安裝一個(gè)紫外燈(多為30W)。內室的紫外線(xiàn)燈應安裝在經(jīng)常工作的座位正上方,離地面2m,外室的紫外線(xiàn)燈可安裝在外室中央。

    (3)外室應有專(zhuān)用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有來(lái)蘇兒水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等。

    (4)內室應有酒精燈、常用接種工具、不銹鋼制的刀、剪、鑷子、70%的酒精棉球、工業(yè)酒精、載玻璃片、特種蠟筆、記錄本、鉛筆、標簽紙、膠水、廢物筐等。

    3.無(wú)菌室的滅菌消毒

    (1)薰蒸:這是無(wú)菌室徹底滅菌的措施。無(wú)菌室使用了較長(cháng)時(shí)間,污染比較嚴重時(shí),應進(jìn)行薰蒸滅菌?捎眉兹、乳酸或硫磺薰蒸。

    (2)噴霧:在每次使用無(wú)菌室前進(jìn)行。噴霧可促使空氣中微粒及微生物沉降,防止桌面、地面上的微塵飛場(chǎng),并有殺菌作用?捎5%石炭酸噴霧。

    (3)紫外線(xiàn)照射:在每次使用無(wú)菌室前進(jìn)行。紫外線(xiàn)有較好的殺菌效果。通常應開(kāi)啟紫外線(xiàn)燈照射30~60min。

    4.無(wú)菌室工作規程

    (1)無(wú)菌室滅菌。每次使用前開(kāi)啟紫外線(xiàn)燈照射30min以上,或在使用前30min,對內外室用5%石炭酸噴霧。

    (2)用肥皂洗手后,把所需器材搬入外室;在外室換上已滅菌的工作服、工作帽和工作鞋,戴好口罩,然后用2%煤酚皂液將手浸洗2分鐘。

    (3)將各種需用物品搬進(jìn)內室清點(diǎn)、就位,用5%石炭酸在工作臺面上方和操作員站位空間噴霧,返回外室,5~10min后再進(jìn)內室工作。

    (4)接種操作前,用70%酒精棉球擦手;進(jìn)行無(wú)菌操作時(shí),動(dòng)作要輕緩,盡量減少空氣波動(dòng)和地面揚塵。

    (5)工作中應注意安全。如遇棉塞著(zhù)火,用手緊握或用濕布包

    裹熄滅,切勿用嘴吹,以免擴大燃燒;如遇有菌培養物灑落或打碎有菌容器時(shí),應用浸潤5%石炭酸的抹布包裹后,并用浸潤5%石炭酸的抹布擦拭臺面或地面,用酒精棉球擦手后再繼續操作。

    (6)工作結束,立即將臺面收拾干凈,將不應在無(wú)菌室存放的物品和廢棄物全部拿出無(wú)菌室后,對無(wú)菌室用5%石炭酸噴霧,或開(kāi)紫外線(xiàn)燈照射30min。

    恒溫培養室

    1.培養室的設置

    (1)培養室應有內、外兩間,內室是培養室,外室是緩沖室。房間容積不宜大,以利于空氣滅菌,內室面積在3.2×4.4=14m2左右,外室面積在3.2×1.8=6m2左右,高以2.5m左右為宜,都應有天花板。

    (2)分隔內室與外室的墻壁上部應設帶空氣過(guò)濾裝置的通風(fēng)口。 (3)為滿(mǎn)足微生物對溫度的需要,需安裝恒溫恒濕機。 (4)內外室都應在室中央安裝紫外線(xiàn)燈,以供滅菌用。

    2.培養室內設備及用具

    (1)內室通常配備培養架和搖瓶機(搖床)。常用的搖瓶機有旋轉式、往復式兩種。

    (2)外室應有專(zhuān)用的工作服、鞋、帽、口罩、手持噴霧器和5%石炭酸溶液、70%酒精棉球等。

    3.培養室的滅菌、消毒

    同無(wú)菌室的滅菌、消毒措施。

    小規模的培養可不啟用恒溫培養室,而在恒溫培養箱中進(jìn)行。

    普通實(shí)驗室

    進(jìn)行微生物的觀(guān)察、計數和生理生化測定工作的場(chǎng)所。室內的陳設因工作側重點(diǎn)不同而有很大的差異。一般均配備實(shí)驗臺、顯微鏡、柜子及凳子。實(shí)驗臺要求平整、光滑,實(shí)驗柜要足以容納日常使用的用具及藥品等。

    更衣室

    是進(jìn)入無(wú)菌室之前工作人員進(jìn)行更衣、洗手的地方。室內設置無(wú)菌室及緩沖室的電源控制開(kāi)關(guān)和放置無(wú)菌操作時(shí)穿的工作服、鞋、帽子、口罩等。

    辦公室

    登記待檢驗樣品;出檢測報告;處理有關(guān)文件資料;放松休息等

    微生物實(shí)驗室通風(fēng)空調

    1.必須安裝獨立的通風(fēng)空調系統以控制實(shí)驗室氣流方向和壓強梯度。該系統必須確保實(shí)驗室使用時(shí),室內空氣除通過(guò)排風(fēng)管道經(jīng)高效過(guò)濾排出外,不得從實(shí)驗室的其他部位或縫隙排向室外;同時(shí)確保實(shí)驗室內的氣流由“清潔”區域流向“污染”區域。進(jìn)風(fēng)口和排風(fēng)口的布局應使實(shí)驗區內的死空間降低到最小程度。

    2.通風(fēng)空調系統為直排系統,不得采用部分回風(fēng)系統。

    3.環(huán)境參數:相對于實(shí)驗室外部,實(shí)驗室內部保持負壓。實(shí)驗間的相對壓強以-30Pa~-40Pa為宜,緩沖間的相對壓強以-15Pa~-20Pa為宜。實(shí)驗室內的溫、濕度以控制在人體舒適范圍為宜,或根據工藝要求而定。實(shí)驗室內的空氣潔凈度以GB 50073—2001《潔凈廠(chǎng)房設計規范》中所定義的七級至八級為宜。實(shí)驗室人工照明應均勻,不眩目,照度不低于500lx。

    4.為確保實(shí)驗室內的氣流由“清潔”區域流向“污染”區域,實(shí)驗室內不應使用雙側均勻分布的排風(fēng)口布局。不應采用上送上排的通風(fēng)設計。由生物安全柜排出的經(jīng)內部高效過(guò)濾的空氣可通過(guò)系統的排風(fēng)管直接排至大氣,也可送入建筑物的排風(fēng)系統。應確保生物安全柜與排風(fēng)系統的壓力平衡。

    5.實(shí)驗室的進(jìn)風(fēng)應經(jīng)初、中、高效三級過(guò)濾。

    6.實(shí)驗室的排風(fēng)必須經(jīng)高效過(guò)濾或加其他方法處理后,以不低于12m/s的速度直接向空中排放。該排風(fēng)口應遠離系統進(jìn)風(fēng)口位置。處理后的排風(fēng)也可排入建筑物的排風(fēng)管道,但不得被送回到該建筑物的任何部位。

    7.進(jìn)風(fēng)和排風(fēng)高效過(guò)濾器必須安裝在實(shí)驗室設在圍護結構上的風(fēng)口里,以避免污染風(fēng)管。

    8.實(shí)驗室的通風(fēng)系統中,在進(jìn)風(fēng)和排風(fēng)總管處應安裝氣密型調節閥門(mén),必要時(shí)可完全關(guān)閉以進(jìn)行室內化學(xué)熏蒸消毒。

    9.實(shí)驗室的通風(fēng)系統中所使用的所有部件均必須為氣密型。所使用的高效過(guò)濾器不得為木框架。

    10.應安裝風(fēng)機啟動(dòng)自動(dòng)聯(lián)鎖裝置,確保實(shí)驗室啟動(dòng)時(shí)先開(kāi)排風(fēng)機后開(kāi)送風(fēng)機。關(guān)閉時(shí)先關(guān)送風(fēng)機后關(guān)排風(fēng)機。

    11.不得在實(shí)驗室內安裝分體空調器。

    其他注意事項

    1.實(shí)驗臺表面應不透水,耐腐蝕、耐熱。

    2.實(shí)驗室中的家具應牢固。為易于清潔,各種家具和設備之間應保持一定間隙。應有專(zhuān)門(mén)放置生物廢棄物容器的臺(架)。家具和設備的邊角和突出部位應光滑、無(wú)毛刺,以圓弧形為宜。

    3.所需真空泵應放在實(shí)驗室內。真空管線(xiàn)必須裝置在線(xiàn)高效過(guò)濾器。

    4.壓縮空氣等鋼瓶應放在實(shí)驗室外。穿過(guò)圍護結構的管道與圍護結構之間必須用不收縮的密封材料加以密封。氣體管線(xiàn)必須裝置在線(xiàn)高效過(guò)濾器和防回流裝置。

    5.實(shí)驗室中應設置洗眼裝置。

    6.實(shí)驗室出口應有發(fā)光指示標志。

    7.實(shí)驗室內外必須設置通訊系統。

    8.實(shí)驗室內的實(shí)驗記錄等資料應通過(guò)傳真機發(fā)送至實(shí)驗室外。

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